瓊脂糖電泳是用瓊脂或者瓊脂糖作支撐介質(zhì)的一種電泳辦法。關(guān)于成員量較大的樣品，如大成員核酸、野病毒等，正?？刹杉{孔徑較大的瓊脂糖凝膠停止電泳結(jié)合。
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支撐介質(zhì)的一種電泳辦法。其綜合原理與其余支撐物電泳最次要差別是：它兼有“成員篩”和“電泳”的雙重作用。
瓊脂糖電泳存正在網(wǎng)絡(luò)構(gòu)造，精神成員經(jīng)過時會遭到屏障，大成員精神正在涌動時遭到的屏障大，因而正在凝膠電泳中，帶電顆粒的結(jié)合沒有只起源于凈點電荷的本質(zhì)和單位，并且還起源于成員大小，這就大大進步了區(qū)分威力。但因為其孔徑相比于蛋白胨太大，對于大少數(shù)蛋白胨來說其成員篩效應(yīng)微有余道，現(xiàn)寬泛使用于核酸的鉆研中。
蛋白胨和核酸會依據(jù)pH沒有同帶有沒有同點電荷，正在磁場中受力大小沒有同，因而跑的進度沒有同，依據(jù)某個原理可將其離開。電泳緩沖液的pH正在6——9之間，離子強度0.02——0.05為最適。罕用1%的瓊脂糖作為電泳支撐物。瓊脂糖電泳約可辨別相差100bp的DNA片段，其區(qū)分率雖比聚丙烯酰胺凝膠低，但它制備簡單，結(jié)合范疇廣。一般瓊脂糖凝膠結(jié)合DNA的范疇為0.2-20kb，應(yīng)用脈沖電泳，可結(jié)合高達10^7bp的DNA片段。
成員正在瓊脂糖電泳中泳動時有點電荷效應(yīng)和成員篩效應(yīng)。DNA成員正在高于等電點的pH濾液中帶負點電荷，正在磁場中向陽極挪動。因為糖-鹽酸骨子正在構(gòu)造上的反復(fù)本質(zhì)，相反單位的雙鏈DNA簡直存正在等量的凈點電荷，因而它們能以異樣的速率向陽極位置挪動。
電泳辦法
正常的核酸檢測只要要瓊脂糖電泳就能夠；假如需求區(qū)分率高的電泳，尤其是只要多少個bp的差異該當取舍聚丙烯酰胺凝膠電泳；用一般電泳沒有適合的碩大DNA鏈該當運用脈沖凝膠電泳。留意碩大的DNA鏈用一般電泳能夠跑沒有出膠孔招致缺帶。
凝膠深淺
關(guān)于瓊脂糖電泳，深淺一般正在0.5——2%之間，低深淺的用于停止大片段核酸的電泳，深奧淺的用于停止小片段綜合。低深淺膠易碎，不慎操作和運用品質(zhì)好的瓊脂糖是處理方法。留意深奧淺的膠能夠使成員大小近似的DNA帶沒有易區(qū)分，形成條帶缺失景象。
緩沖液
罕用的緩沖液有TAE和TBE，而TBE比TAE有著更好的緩沖威力。電泳時氣用新制的緩沖液能夠顯然進步電泳成效。留意電泳緩沖液屢次運用后，離子強度升高，pH值下降，緩沖功能降落，能夠使DNA電泳發(fā)生條帶依稀和沒有規(guī)定的DNA帶遷徙的景象。
電壓和量度
電泳時電壓沒有該當超越20V/cm，電泳量度該當?shù)陀?0℃，關(guān)于碩大的DNA電泳，量度該當?shù)陀?5℃。留意假如電泳時電壓和溫渡過高，能夠招致涌現(xiàn)條帶依稀和沒有規(guī)定的DNA帶遷徙的景象。尤其是電壓太大能夠招致小片段跑出膠而涌現(xiàn)缺帶景象樣品的純度和形態(tài)
留意樣品中含鹽量太高和含雜質(zhì)卵白均能夠發(fā)生條帶依稀和條帶缺失的景象。酒精積淀能夠去除必要的鹽，用酚能夠去除卵白。留意變性的DNA樣品能夠招致條帶依稀和缺失，也能夠涌現(xiàn)沒有規(guī)定的DNA條帶遷徙。正在上樣前沒有要對于DNA樣品加熱，用20mM NaCl緩沖液濃縮能夠預(yù)防DNA變性。
的上樣
準確的DNA上樣量是條帶明晰的保障。留意太多的DNA上樣量能夠招致DNA帶型依稀，而太小的DNA上樣量則招致帶信號弱以至缺失。
的取舍
電泳定然要運用DNA Marker或者已知大小的正比例照DNA來約莫DNA片段大小。Marker該當取舍正在指標片段大小左近ladder較密的，那樣對于指標片段大小的約莫才比擬精確。需求留意的是Marker的電泳異樣也要相符DNA電泳的操作規(guī)范。假如取舍λDNA/HindIII或者許λDNA/EcoRI的酶切Marker，需求事后65℃加熱5min，冰上結(jié)冰后運用。從而防止HindIII或者EcoRI酶切形成的粘性接頭招致的片段聯(lián)接沒有規(guī)定或者條帶信號弱等景象。
凝膠的紡織和視察
試驗室罕用的核酸紡織劑是溴化乙錠（EB），紡織成效好，操作便當，然而穩(wěn)固性差，存正在毒性。留意視察凝膠時應(yīng)依據(jù)顏料沒有同運用適合的光源和激起跨度，假如激起跨度沒有對于，條帶則沒有易視察，涌現(xiàn)條帶依稀的景象。
回整編者
片段的膠回收辦法
電泳洗脫法
低熔點瓊脂糖凝膠電泳挖塊法
凍融回收法
玻璃奶回收法
柱回收法
膠回收容意須知
將電泳槽用ddH2O重復(fù)蕩滌腌臜，倒入鮮活配制的滅鼠電泳緩沖液；依據(jù)點樣量制備適合薄厚的瓊脂糖凝膠板；
切膠時盡能夠切掉沒有含DNA片段的凝膠；
要過分縮小DNA正在紫外下的照耀工夫以縮小對于DNA的損害；熔膠要徹底。
